李舜:广东省PEDV分子流行病学调查及卵黄抗体制剂防控的探讨
PED流行分布情况
年,PED首次在英国报道;年,比利时科学家首次分离出病毒CV,并命名为PEDV;20世纪80年代初,国内首次确定暴发PEDV;年10月,国内暴发大规模的PEDV感染;年4月,美国暴发PEDV感染,并迅速传播至加拿大及墨西哥;近年来,国内外PEDV感染都呈现大流行,并且在意大利出现重组毒株。
病理变化
所有年龄段的猪只均可感染,但主要侵害10日龄以内的仔猪,发病率及死亡率均可高达%;该病的主要病理变化主要表现为小肠扩张,小肠内充满黄色液体,肠系膜出血,肠系膜淋巴结肿大,肠绒毛缩短,空肠段上皮细胞空泡形成及表皮脱落。
目的意义
自从年10月,国内出现大暴发之后,PEDV在国内外都呈现一个大流行的趋势,而且对哺乳仔猪的损害最大。有研究表明,这一现象同PEDV毒株的变异有关,为了探讨这一问题,我们对广东省的PEDV进行了分子流行病学调查,来揭示PED在华南地区的流行规律;而且,目前为止,仍然没有一个良好的防控方法,因此,我们采用原核表达的方法表达了抗原,并制作了卵黄抗体,来探讨PEDV的防控。
S蛋白
是病毒粒子的表面抗原。可介导病毒进入自然宿主细胞,刺激机体产生中和抗体。S蛋白的同源性非常低,在血清学上不存在交叉反应。S基因差异变化较大,特别是S1基因部分,单个基因的突变、插入和缺失就能使病毒的毒力和表型等差异显著,影响病毒的致病机制。被认为是蛋白疫苗的首选!
M蛋白
是病毒粒子的主要跨膜糖蛋白,其含量最多,并且病毒的组装和成熟依赖于该蛋白,在补体存在的条件下,能诱导病毒机体产生中和抗体,同时也能间接诱导干扰素的表达。其保守性强,一般选择M基因作为检测目的基因。M蛋白被认为是检测的首选!
卵黄抗体
被认为是一种丰富、便宜和方便的特异性抗体来源,耐酸、耐热、性能稳定。经口服可以起到抗特异性病原体的作用。
在饲料中添加可以提高早期断奶仔猪的采食量和日增重,促进仔猪生长,改进断奶仔猪的饲料转化效率。
减少腹泻和死亡率,降低乳猪断奶综合症的发生,提高经济效益,生产成本低,产量高,有希望应用于市场。
经口服后在小肠内局部发挥作用,不存在药物残留和耐药性的问题。同时,鸡和猪很少有共患病原体,不出现交叉感染。
卵黄抗体的制备
1.构建S1基因的高效表达系统
S1部分基因的原核表达,及重组表达质粒的构建,诱导表达后经纯化得到特异性良好的S1蛋白。
2.蛋鸡的免疫
对高产蛋鸡进行免疫,共分为五组,分别在一免(0.5mL/只)后第10d、25d、60d、95d(1mL/只)进行加强免疫,免疫前采血收集血清,每天收集鸡蛋,进行效价检测及卵黄抗体的制备。
卵黄抗体液制备工艺
卵黄抗体粉制备工艺
卵黄抗体冻干粉制备工艺
临床试验
地点:广东省某规模化猪场,正在暴发PED,对出生后患病仔猪进行免疫
方法:
卵黄液:2倍稀释后,口服,每头仔猪5mL/次,每天2次,连续饲喂3d;
卵黄粉:卵黄粉:奶粉=2:1,口服,6g/头,每天2次,连续饲喂3d;
冻干粉:mg溶于60mL水中,2mL/头,腹腔注射,每天1次,连续3d。
试验结果
由于制粉过程中经过高温高压,引起抗体有一定程度的减少
李舜
课题:广东省PEDV分子流行病学调查及卵黄抗体制剂防控的探讨
佛山科学技术学院在读硕士研究生
专业:动物免疫病理学
—评委—
江青艳
华南农业大学动物科学院院长、广东省珠江学者特聘教授、农业部《动物福利通则》标准评审专家、第三届全国饲料评审委员会委员
樊福好
动物疫情应急专家、广东省养猪行业协会专家委员会召集人、农业农村部种猪质量监督检验测试中心(广州)质量负责人兼检测室主任
黎小兵
壹号食品总裁、壹号土猪联合创始人
来源:养猪信息网
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